[摘 要] 目的：探讨α-常春藤皂苷（α-Hed）诱导非小细胞肺癌（NSCLC）细胞凋亡的作用靶点及其潜在机制，明确α-Hed与顺铂（DDP）联用后对相应的靶点蛋白表达的影响。方法：采用CCK-8法检测不同浓度α-Hed处理后NSCLC细胞A549、H1299和PC-9的存活率，采用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率，采用WB法检测细胞中C-caspase-3和Bcl-2蛋白的表达。通过网络药理学相关方法筛选α-Hed的潜在靶点，利用分子对接法分析其结合效果，WB法检测靶点蛋白的表达。通过CCK-8法、细胞集落形成实验和WB法检测α-Hed与DDP联用对NSCLC细胞的抑制作用。结果：给药24和48 h后，10、15和20 μmol/L α-Hed可以显著抑制NSCLC细胞增殖活力（均P<0.01）；与对照组相比，20 μmol/L α-Hed处理后细胞凋亡率显著升高（P<0.01）；α-Hed可上调NSCLC细胞中C-caspase-3的表达（P<0.05），下调Bcl-2的表达（P<0.05）。网络药理学和分子对接筛选出结合亲和力小于-5 kcal/mol的靶点AKT1、STAT3、EGFR和JAK2。WB法检测结果显示，α-Hed处理后A549、H1299细胞中EGFR、p-AKT/AKT、p-STAT3/STAT3和JAK2蛋白的表达均明显下调（均P<0.05）。α-Hed与DDP联用后，更显著地抑制NSCLC细胞的增殖（P<0.01），进一步下调EGFR、p-AKT/AKT、p-STAT3/STAT3和JAK2蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）。结论：α-Hed通过下调EGFR和JAK2的表达抑制STAT3和AKT的磷酸化，诱导NSCLC细胞凋亡，与DDP联用后其抑制效果增强，EGFR/AKT和JAK2/STAT3通路也进一步被抑制。

[摘 要] 目的：探讨多结节非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的驱动基因突变情况与临床病理特征的关系，为多结节NSCLC患者治疗提供分子诊断依据。方法：本研究共纳入2018年1月至2023年10月间云南省肿瘤医院分子诊断中心检测的121例多结节NSCLC患者的253个肺结节肿瘤组织标本，以第二代测序（NGS）技术或扩增阻滞突变系统PCR（ARMS-PCR）技术检测多结节NSCLC 组织中驱动基因突变情况，分析其与患者临床病理特征的关系，比较不同结节间肺癌驱动基因的突变异质性。结果：与非“宣威”NSCLC相比，“宣威”多结节NSCLC患者驱动基因突变具有显著的地域特点，表现在“宣威”患者具有较低（20%）的EGFR敏感突变（L858R、19-del）及较高（27.26%）的EGFR少见突变（主要为G719/S768I、G719）；“宣威”多结节NSCLC患者的KRAS突变率（27.27%）亦显著高于非“宣威”患者突变率（12.59%）（P<0.05）。此外，“宣威”多结节NSCLC患者驱动基因突变不一致率高达69.23%，远高于非“宣威”患者驱动基因突变不一致率（55.07%）（P<0.05）。结论：“宣威”多结节NSCLC患者具有较高的EGFR少见突变及KRAS突变率，同一患者不同病灶之间存在更高的驱动基因突变异质性，本研究将为“宣威”多结节NSCLC的诊疗策略提供更多的选择。

[摘 要] 目的：探讨解偶联蛋白2（UCP2）抑制剂京尼平（GEN）对人下咽癌FaDu细胞增殖及线粒体功能的影响。方法：使用不同浓度的GEN作用于FaDu细胞24 h，实验分为GEN 0（对照）、50、100、200和400 μmol/L组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力，DCFH-DA探针及JC-1染色联合流式细胞术检测GEN对FaDu细胞活性氧（ROS）含量及线粒体膜电位的影响，激光共聚焦显微镜观察GEN对FaDu细胞线粒体膜通透性转换孔的影响，可见分光光度法检测细胞中乳酸的含量，WB法检测细胞中UCP2蛋白的表达变化。结果：与对照组相比，GEN可显著抑制FaDu细胞的增殖活力（P<0.05或P<0.01）、细胞中UCP2蛋白的表达（P<0.05），降低线粒体膜电位（P<0.05或P<0.01）、乳酸含量（P<0.000 1），改变细胞线粒体膜孔道通透性，提高细胞中ROS水平（P<0.05或P<0.01）。结论：GEN通过调节细胞中UCP2的表达水平进而影响细胞的氧化还原能力及线粒体功能，从而发挥抑制人下咽癌FaDu细胞增殖并诱导细胞凋亡的作用。

[摘 要] 目的：探究中链脂肪酸癸酸对CD8+ T细胞活化的影响，及其对CD8+ T细胞介导的抗肿瘤免疫反应的作用和机制。方法：建立C57BL/6小鼠黑色素瘤B16F10皮下荷瘤模型，随机分为癸酸组（10 mg/kg癸酸灌胃）和对照组（等量溶剂灌胃），观察癸酸对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响，采用流式细胞术检测肿瘤微环境中浸润CD8+ T细胞的活化水平。建立B16F10-OVA和OT-I T细胞共培养体系，采用流式细胞术检测癸酸对CD8+ T细胞的肿瘤细胞杀伤能力的影响。采用α-CD8抗体清除B16F10荷瘤小鼠体内CD8+ T细胞，观察对小鼠肿瘤体积的影响。小鼠原代CD8+ T细胞经癸酸处理后，采用WB、ELISA及qPCR、流式细胞术检测T细胞受体（TCR）活化、效应细胞因子产生以及增殖和代谢水平。在B16F10荷瘤小鼠模型中，观察α-PD-1抗体联合癸酸给药对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响。结果：在小鼠黑色素瘤荷瘤模型中，与对照组相比，癸酸组小鼠移植瘤体积显著降低且生存率显著提高（均P<0.05），肿瘤浸润CD8+ T细胞IFN-γ和TNF-α的表达水平显著升高（P<0.01）。经癸酸处理的OT-I T细胞对B16F10-OVA细胞的杀伤水平显著升高（P<0.01）。在荷瘤小鼠模型中用α-CD8抗体清除CD8+ T细胞后，癸酸对移植瘤的抑制作用显著降低（P<0.000 1）。小鼠原代CD8+ T细胞经癸酸处理后，TCR活化水平显著升高、细胞因子IL-2和IFN-γ的产生增多、线粒体代谢水平显著上调（均P<0.05）。在黑色素瘤荷瘤小鼠模型中，癸酸与α-PD-1抗体联用，能够显著抑制小鼠移植瘤生长并提高其生存率（均P<0.05）。结论：癸酸能够促进CD8+ T细胞活化、增强其抗肿瘤免疫反应能力。

[摘 要] 目的：探究连翘苷（Phi）通过调控Hippo/YAP信号通路对结肠癌LS180细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：用不同浓度（0、5、10、20、40、80 µmol/L）的Phi处理人结肠癌LS180细胞，MTT法检测24、48 和72 h时的细胞活力。将LS180细胞分为对照组、Phi-L（5 µmol/L Phi）组、Phi-M（10 µmol/L Phi）组、Phi-H（20 µmol/L Phi）组、Phi-H+YAP抑制剂维替泊芬（VP）组（20 µmol/L Phi+5 µmol/L VP），各组均处理24 h。EdU法检测Phi对各组细胞增殖的影响，划痕愈合实验、Transwell小室法分别检测Phi对细胞迁移和侵袭的影响，免疫荧光法和WB法检测Phi对细胞Ki-67表达率和LATS1、YAP和p-YAP、MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin表达的影响。构建LS180细胞移植瘤裸鼠模型，观察Phi对移植瘤体积和质量的影响，免疫荧光法和WB法检测移植瘤组织中Ki-67表达率和LATS1、YAP和p-YAP蛋白的表达水平。结果：与对照组比较，Phi-L、Phi-M和Phi-H组LS180细胞EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、Ki-67阳性率、MMP-2、MMP-9、N-cadherin表达均显著降低（均P<0.05），E-cadherin、LATS1和p-YAP/YAP表达均显著升高（均P<0.05）；同时使用VP则部分逆转了Phi对LS180细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用（均P<0.05）。Phi显著抑制裸鼠移植瘤生长，与对照组比较，Phi组裸鼠移植瘤体积、质量和Ki-67阳性率均显著降低（均P<0.05），LATS1和p-YAP/YAP水平均显著升高（均P<0.05）。结论：Phi可能通过激活Hippo/YAP信号通路抑制结肠癌LS180细胞的恶性生物学行为。

[摘 要] 目的：探讨补肾健脾方（BSJP）介导法尼醇X受体（FXR）抑制肝癌细胞AH-130诱导的癌性恶病质（CC）大鼠模型的作用及其机制。方法：腹腔注射AH-130细胞建立肝癌CC大鼠模型，实验分为空白对照组、模型对照组、FXR激动剂（CDCA）组、BSJP组和BSJP + CDCA组。建模后，用CDCA、BSJP连续治疗大鼠16 d，每周称量大鼠体质量。实验结束时开腹，取腹主动脉血、粪便及附睾、腹股沟和肩胛区棕色脂肪质量。采用液相色谱-质谱法（LC-MS）检测大鼠血清和粪便中胆汁酸组分及含量，WB、qPCR法检测大鼠空肠、棕色及白色脂肪组织中FXR、Wnt家族成员10b（Wnt10b）、β-连环蛋白（β-catenin）、解偶联蛋白1（UCP-1）的表达。结果：与空白对照组相比，模型对照组大鼠体质量明显降低（P < 0.01）；与模型对照组相比，CDCA、BSJP、BSJP + CDCA组大鼠体质量均增加（均P < 0.01）。与空白对照组相比，模型对照组附睾、腹股沟和肩胛区域及总棕色脂肪质量均上升（均P < 0.05）；与模型对照组相比，各治疗组大鼠附睾、腹股沟区、棕色脂肪质量均下降（均P < 0.05），而肩胛区棕色脂肪组织质量下降无差异（P > 0.05）；各治疗组总棕色脂肪质量均显著下降（P < 0.05或P < 0.01）。LC-MS分析显示，各组大鼠血清及粪便中胆汁酸组成及含量均发生改变。qPCR、WB法结果证实，与模型组相比，BSJP和BSJP + CDCA可促进大鼠回肠、棕色脂肪及白色脂肪组织中FXR mRNA和蛋白表达升高（均P < 0.05），Wnt10b、β-catenin、UCP-1 mRNA和蛋白表达均下降（均P < 0.05）。结论：BSJP能够抑制肝癌AH-130细胞诱导的大鼠CC，并减轻由此引起的体质量下降和棕色脂肪组织的形成，其机制可能涉及调控FXR并通过抑制棕色脂肪中与Wnt通路相关的Wnt10b、β-catenin和UCP-1的表达来实现。

Humans ; Muscular Dystrophy, Duchenne/epidemiology* ; Prevalence ; Myocardium

Bavachinin is a dihydroflavone isolated from dried ripe fruits of Psoralea corylifolia L.，which has various pharmacological activities, such as anti-tumor, anti-virus, anti-diabetes, anti-inflammatory and neuroprotective, and good potential in clinical applications. With the increasing concern about the safety of P. corylifolia applications in clinical, the bavachinin has been found to be one of the main components causing liver injury. In this paper, the pharmacological activities and hepatotoxicity of bavachinin in the recent 20 years were reviewed, in order to provide reference for the further study and clinical application.

Helminth infections are widespread worldwide, and pose a serious threat to human health and animal husbandry development. Understanding of helminth-host interactions is critical to effective control and ultimate eradication of helminthiasis. Following host infections, helminth infections firstly initiate innate immune responses and then mediate adaptive immune responses. Type 1 immune responses are predominant at early stage of helminth infections, which mainly play anti-infective actions, and type 2 immune responses are predominant at late stage of infections, which are associated with helminth immune evasion and aggravation of tissue damages. This review summarizes the progress of researches on type 1/2 immune responses-associated signaling pathways mediated by helminth infections in hosts.
Animals ; Humans ; Helminthiasis ; Helminths ; Immunity, Innate ; Signal Transduction ; Host-Parasite Interactions

[摘 要] 目的：探讨山柰酚诱导人非小细胞肺癌（NSCLC）NCI-H1650细胞发生自噬及其机制。方法：常规培养NCI-H1650细胞，用不同浓度山柰酚处理细胞，用CCK-8法、MTT法以及EdU法检测山柰酚对NCI-H1650细胞增殖能力的影响，用自噬双标记腺病毒mCherry-EGFR-LC3感染实验检测山柰酚对NCI-H1650细胞发生自噬的影响，用WB法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中自噬相关蛋白及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达，用qPCR法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中Met mRNA的表达。采用荧光素酶标记A549-luc细胞建立裸鼠移植瘤模型后用山柰酚进行处理，用活体动物成像技术观察移植瘤生长情况，用WB法检测移植瘤组织中自噬相关蛋白以及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结果：山柰酚能显著抑制NCI-H1650细胞的增殖能力（P<0.05），山柰酚处理后NCI-H1650细胞内的自噬小体数量明显增加（P<0.05）、自噬标志蛋白LC3B和beclin1表达均明显上调（均P<0.05）、P62表达明显下调（P<0.05），山柰酚可明显抑制NCI-H1650细胞中Met mRNA和蛋白的表达（均P<0.05）、抑制p-PI3K p85、PI3K p85、p-Akt和p-mTOR蛋白表达（均P<0.05）。山柰酚抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长（P<0.05）和影响其体内自噬、Met/PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达（均P<0.05）。结论：山柰酚通过影响Met/PI3K/Akt/mTOR通路诱导NSCLC NCI-H1650细胞发生自噬，进而抑制其增殖能力。