[摘 要] 目的：开发针对结直肠癌（CRC）个性化治疗的新抗原肽疫苗，探讨新抗原肽及其诱导的新抗原反应性T（NRT）细胞治疗CRC的可行性和有效性。方法：提取小鼠结肠癌CT26细胞的DNA和RNA，采用全外显子和转录组测序分析肿瘤基因的突变及表达。通过基于机器学习的新抗原预测体系，筛选、合成具有高免疫原性多肽。用合成的多肽经皮下注射免疫小鼠，通过流式细胞术检测免疫鼠脾细胞的IFN-γ分泌水平，筛选具有强免疫原性多肽。用免疫原性多肽负载小鼠骨髓来源的树突状细胞（BMDC）免疫结肠癌建模小鼠，通过ELISPOT检测效应细胞分泌IFN-γ的能力，时间分辨荧光免疫分析法检测免疫鼠脾细胞对相应靶细胞的杀伤力，观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况和小鼠存活期。结果：新抗原肽Glud1-V546I具有更强的诱导NRT细胞分泌IFN-γ的能力（P < 0.000 1）。与野生肽（Glud1-WT）相比，Glud1-V546I在荷瘤鼠体内诱导的NRT细胞有更高的IFN-γ分泌能力（P <0.000 1）和细胞毒作用（P < 0.000 1）。同时，Glud1-V546I能明显抑制小鼠肿瘤生长（P < 0.001）并延长荷瘤鼠的生存期（P < 0.01）。结论：小鼠CT26细胞的新抗原肽Glud1-V546I能够显著促进小鼠NRT细胞的IFN-γ的分泌，用其制备的DC疫苗在结肠癌荷瘤鼠体内显示出有效的抗肿瘤反应，提示开发基于新抗原的CRC个性化免疫治疗是可能的。
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