circSMARCA5 promotes non-small cell lung cancer cell proliferation via enrichment of Treg cells by CCL5
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2023.07.006
- VernacularTitle:circSMARCA5通过CCL5富集Treg细胞促进非小细胞肺癌细胞的增殖
- Author:
JI Juanjuana
1
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WANG Qiana
1
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SUN Lulua
1
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YU Wenyuea
1
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BAO Yina
1
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ZHU Jiaa
1
;
TIAN Fangb
1
Author Information
1. a. Department of Respiratory Medicine; b. Central Laboratory, Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine & Jiangsu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Nanjing 210029, Jiangsu, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
非小细胞肺癌；circSMARCA5；C-C趋化因子配体5；Treg细胞
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2023;30(7):586-593
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：检测circSMRCA5在非小细胞肺癌（NSCLC）组织和细胞中的表达，以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制。方法：用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A549和H1975细胞。采用qPCR法检测稳定转染细胞中circSMARCA5的表达水平。通过CCK-8、克隆形成、细胞周期和异种移植瘤实验检测circSMARCA5过表达对A549和H1975细胞生物学行为的影响。通过转录组测序、KEGG和GO富集分析，确定circSMARCA5可能的靶基因。分别构建circSMARCA5过表达A549、Lewis细胞BABL/c裸鼠和免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤模型，观察circSMARCA5对裸鼠皮下移植瘤生长的影响，流式细胞术检测对Lewis细胞移植瘤组织中Treg细胞水平的影响。结果：circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达（P<0.01）。过表达circSMARCA5可以在体外促进NSCLC细胞的增殖（P<0.05，P<0.01）。体内实验中，circSMARCA5可以促进裸鼠皮下移植瘤的生长（P<0.01）。机制上，经KEGG和GO富集分析，确定C-C趋化因子配体5（CCL5）为circSMARCA5的下游靶基因。过表达circSMARCA5组A549和H1975细胞中CCL5的表达量增加（均P<0.05）。circSMARCA5介导的CCL5上调促进了免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤的生长。C57小鼠皮下移植瘤制备成的单细胞悬液行流式细胞术检测显示，circSMARCA5过表达组的Treg细胞比例高于对照组[（3.1±0.5）% vs （1.0±0.1）%，P<0.05]。结论：circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达，其可能通过CCL5将Treg细胞招募到肿瘤中，导致肿瘤的免疫逃逸，促进NSCLC的进展。
- Full text:20230706.pdf
