ENO1 promotes gastric cancer progression by regulating alternative splicing of PKM

WANG Na1; QIAO Hui2; DENG Chenghui3; YANG Lei3; ZENG Miaomiao3; GUAN Quanlin3

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ENO1 promotes gastric cancer progression by regulating alternative splicing of PKM

VernacularTitle:烯醇化酶1通过调控PKM的可变剪接促进胃癌的进展
Author: WANG Na1 ^{1
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Author Information

1. Department of Oncology, The Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730000, Gansu, China;
2. Department of Oncology, The First Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730000, Gansu, China;
3. Department of Surgical Oncology, The First Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730000, Gansu, China
Publication Type:Journal Article
Keywords: RNA结合蛋白；烯醇化酶1；免疫沉淀；胃癌；增殖；迁移；侵袭；凋亡
From: Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2025;32(7):706-715
CountryChina
Language:Chinese
Abstract: [摘要] 目的：探讨烯醇化酶1（ENO1）对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其分子机制。方法：通过WB法检测ENO1在人胃癌细胞HGC27、MKN-45、N-87、MGC803、BGC-823及人胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达水平，利用CRISPR、过表达等基因编辑工具分别构建ENO1敲低及敲低—恢复表达细胞株，将MKN-45和BGC-823细胞分别分组为Ctrl组、ENO1 KD组、ENO1 KD-OE组。通过克隆形成实验、EdU染色、划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测敲低或敲低—恢复表达ENO1对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。构建胃癌细胞裸鼠移植瘤模型，通过小动物活体成像技术及肿瘤组织块测量观察ENO1对肿瘤生长的影响。在MKN-45细胞中通过RNA干扰技术沉默ENO1，利用RNA免疫共沉淀-转录组测序（RIP-Seq）结合生物信息学分析技术鉴定ENO1下游的靶基因，分析ENO1调控胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制。结果：ENO1在胃癌细胞中表达水平均显著升高（P < 0.01或P < 0.001）。在MKN-45和BGC-823细胞中敲低ENO1可显著降低胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力并促进细胞凋亡（P < 0.001或P < 0.000 1）；回复实验结果显示，恢复ENO1的表达后，胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力均显著提高并减少细胞凋亡（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001或P < 0.000 1）。裸鼠荷瘤实验结果表明，敲低ENO1的表达可以显著抑制裸鼠移植瘤的生长（P < 0.000 1）。与ENO1蛋白具有相互作用的差异基因主要富集于RNA剪切相关通路，且ENO1蛋白与PKM基因具有相互作用，胃癌组织中ENO1与PKM2基因表达事呈正相关（r = 0.886）。结论：ENO1在胃癌细胞中呈高表达，其通过与PKM的前体mRNA相互作用影响PKM的RNA剪接过程，进而调控PKM2的表达水平并促进胃癌的进展。