Construction and functional study of CD19 CAR-T cells that secrete IL-2 locally
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2025.04.002
- VernacularTitle:局部分泌IL-2的CD19 CAR-T细胞构建与功能
- Author:
WANG Wenjuan1
1
,
2
,
3
;
CHEN Jing2
1
,
2
,
3
;
HU Zhou1
1
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2
,
3
;
LIU Xiuying1
1
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2
,
3
;
WANG Jianxun1, 3
1
,
2
,
3
Author Information
1. School of Life Sciences, Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 102400, China;
2. Department of Traditional Chinese Medicine, School of Health Medicine, Three Gorges University, Yichang 443002, Hubei, China;
3. Shenzhen Institute of Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Shenzhen 518118, Guangdong, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
SynNotch系统；CAR-T细胞；IL-2；CD19
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2025;32(4):356-363
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探讨基于新型单载体SynNotch系统构建的局部分泌IL-2的CAR-T细胞（Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞）对传统CD19 CAR-T细胞功能的影响。方法：基于本课题组前期构建的单载体SynNotch系统，将CD19特异性FMC63抗体与IL-2表达模块整合，通过自失活逆转录病毒载体转导T细胞制备Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞。诱导验证实验分为Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞组和未转导T细胞组，通过ELISA检测抗原刺激后IL-2分泌水平。采用CFSE染色法检测在Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞存在时，CD19 CAR-T细胞与肿瘤Raji-Luc或SW620-CD19-Luc细胞共培养时，IL-2的分泌对CD19 CAR-T细胞增殖的影响。流式细胞术检测CD69表达，观察在Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞分泌IL-2的情况下，CD19 CAR-T细胞与Raji-Luc细胞共培养时的激活情况。结果：成功构建自失活逆转录病毒载体Syn.CD19.IL-2 CAR，制备出Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞，病毒滴度 > 1×107拷贝/mL，转导效率达37.1%。抗原刺激后，SynNotch CAR-T细胞IL-2分泌量显著高于未转导T细胞（P < 0.001）。在Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞分泌IL-2时，CD19 CAR-T细胞具有更强的增殖能力和更高的活化水平（均P < 0.001）。结论：成功构建的Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞能显著增强CD19 CAR-T细胞的增殖和活化能力。
- Full text:202505211004426032720250402.pdf
