[摘 要] 目的：探讨环化自erb-b2受体酪氨酸激酶2（ERBB2）基因的circ_0007766分子在前列腺癌（PCa）细胞中的作用及缺氧对其表达调控的影响。方法：qRT-PCR检测circ_0007766分子在PCa细胞及组织中的表达；分别转染circ0007766的siRNA至PCa细胞DU145和PC3中，平板克隆实验、CCK-8实验和Transwell 实验检测circ_0007766敲低对PCa细胞克隆形成、增殖、迁移和侵袭能力的影响；厌氧袋法建立DU145和PC3细胞的缺氧细胞模型，WB法检测缺氧通路关键分子HIF-1α的蛋白表达，qRT-PCR检测缺氧模型细胞中circ_0007766分子的表达，WB检测RNA结合蛋白真核翻译起始因子4A3（EIF4A3）的蛋白水平表达，RNA免疫沉淀（RIP）法检测缺氧条件下EIF4A3与circ_0007766的结合，qRT-PCR进一步检测缺氧条件下敲低EIF4A3对circ_0007766表达的影响。结果：circ_0007766在PCa细胞（P < 0.01）及PCa组织（P < 0.05）中呈高表达；敲低circ_0007766（P < 0.05或P < 0.01）能显著抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P < 0.01）。缺氧条件下HIF-1α蛋白表达增加，表明缺氧细胞模型建立成功。qRT-PCR检测结果显示，相较于常氧组，缺氧组circ_0007766的表达显著升高（P < 0.01），WB法检测结果显示缺氧组细胞中EIF4A3 的蛋白表达增强。RIP实验结果显示，circ_0007766在EIF4A3富集组高度富集（P < 0.01）。qRT-PCR检测结果显示，缺氧可显著促进circ_0007766的表达，同时，敲低EIF4A3分子可显著降低缺氧诱导的circ_0007766的表达（P < 0.05或P < 0.01）。结论: circ_0007766在PCa细胞中扮演着促癌分子的角色，其表达形成与缺氧条件下EIF4A3分子的调控有关。

[摘 要] 目的：探讨构建靶向CD7抗原的嵌合共刺激受体（CCR）并制备该受体修饰的健康供者来源γδ T细胞，以评估其对急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）的体内与体外杀伤作用。方法：构建携带CD7-DAP10-CCR的慢病毒载体，并转导健康人外周血γδ T细胞，制备靶向CD7抗原的CCR γδ T细胞（CD7-DAP10-CCR-γδ T），所获细胞借助表达CD64、CD86和CD137L的人工抗原提呈细胞（aAPC）进行体外扩增。采用Annexin Ⅴ/7-AAD方法检测CD7-DAP10-CCR-γδ T对T-ALL细胞（Jurkat）、CD7缺陷型Jurkat细胞（CD7⁻ Jurkat）及异体健康人原代αβ T细胞的体外杀伤作用，共设置了3组效靶比（E∶T = 1∶1、1∶3和1∶10），孵育时间为18~24 h。其中，Jurkat细胞作为CD7阳性靶细胞，CD7⁻ Jurkat作为CD7阴性靶细胞以验证杀伤特异性，而异体健康人原代αβ T细胞则作为CD7阳性正常细胞对照，用于评估CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞的脱靶效应。此外，在T-ALL荷瘤免疫缺陷小鼠体内验证药效，通过定期对荷瘤免疫缺陷小鼠进行活体成像、体质量检测及生存期观察，评估CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞在荷瘤免疫缺陷小鼠体内的药效。结果：成功利用aAPC体外制备出CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞，其平均扩增倍数超过10 000倍。体外杀伤实验表明，该细胞对T-ALL细胞具有较高的杀伤能力（P < 0.01），对Jurkat 细胞具有较高的毒性（P < 0.01），对CD7⁻ Jurkat细胞杀伤作用有限，而对高表达CD7的正常原代αβ T细胞基本无杀伤作用；荷瘤免疫缺陷小鼠体内药效试验结果显示，相对于对照PBS组，经CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞治疗后，荷瘤免疫缺陷小鼠的生存期显著延长（P < 0.01）。结论：体外借助aAPC能成功制备CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞，并且CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞在体外、小鼠体内均对T-ALL细胞具有较强的杀伤作用，表明CD7-DAP10-CCR-γδ T细胞具备对T-ALL的治疗潜力。