[摘 要] 目的：探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞（CAR-T细胞）的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法：通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的BamHⅠ/EcoRⅠ位置，构建第二代CAR慢病毒载体GPC3-BBZ及GPC3-BBZ-NFAT-IL-7，以293T细胞包装相应的慢病毒载体后，感染人T细胞制备CAR-T细胞。实验分为未转导T细胞（NT）组、GPC3- BBZ CAR-T细胞组、GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞组。采用流式细胞术检测各组CAR-T细胞中CAR的表达水平，qPCR法检测经GPC3蛋白激活的CAR-T细胞中IL-7 mRNA的表达水平，细胞计数法检测CAR-T细胞在GPC3抗原刺激下的增殖能力，ELISA检测CAR-T细胞在受到肿瘤细胞刺激后IL-7、IFN-γ和TNF-α的分泌水平。应用实时细胞分析（RTCA）技术检测CAR-T细胞对人肝癌Huh-7细胞的杀伤作用。结果：成功构建慢病毒载体GPC3-BBZ和GPC3-BBZ-NFAT-IL-7，制备出靶向GPC3的CAR-T细胞。经GPC3抗原激活后，GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞可有效表达IL-7 mRNA（P < 0.01），其表现出更强的增殖能力（P < 0.05）。与GPC3-BBZ CAR-T细胞相比，GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞与GPC3阳性靶细胞Huh-7细胞共培养后，分泌更高水平的IL-7、IFN-γ和TNF-α（P < 0.01或P < 0.001）。RTCA结果显示，GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞对GPC3阳性Huh-7细胞的杀伤活性显著高于GPC3-BBZ CAR-T细胞（P < 0.05）。结论：成功制备可诱导表达IL-7的靶向GPC3的CAR-T细胞，IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的免疫活性，在体外展现出较强的肿瘤细胞杀伤能力。