[摘 要] 目的：肝细胞癌（HCC）是肝脏最常见的原发性恶性肿瘤。早期HCC诊出率低，多数患者就诊时已经是晚期，预后极差，因此亟须探索有效的HCC早期诊断标志物及干预治疗靶点。癌症/睾丸抗原1A（CTAG1A）在多种肿瘤中异常表达并且具有强免疫原性，但其在HCC中的表达特性及免疫原性尚不明确。本研究旨在鉴定HCC组织和细胞中CTAG1A的表达趋势和免疫原性，为HCC早期诊断提供新的生物标志物，为临床免疫治疗提供新的潜在靶点。方法：通过转录组芯片筛选10对极早期HCC（BCLC 0期HCC）肿瘤与癌旁组织的差异表达基因谱。利用RT-qPCR在独立大样本（BCLC 0、A、B、C期HCC组织及癌旁组织， n = 149）及多种肝癌细胞系中验证CTAG1A的表达。通过生物信息学工具（IEDB数据库的TepiTool和Swiss Model）预测CTAG1A的MHC-Ⅰ型和MHC-Ⅱ型抗原表位。采用固相多肽合成法合成候选肽段，经HPLC纯化及质谱验证后，使用IFN-γ酶联免疫斑点法（ELISpot）检测9例HCC患者外周血单个核细胞（PBMC）对各个肽段的特异性T细胞反应。临床样本来源于2015至2022年海军军医大学第三附属医院（东方肝胆外科医院）收治的HCC患者，所有样本的采集使用均获患者知情同意，并经东方肝胆外科医院伦理委员会审查批准（EHBHKY2015-01-017），严格按照相关要求和伦理规定严格执行。采用SPSS 30.0软件进行统计学处理，通过ROC曲线评估诊断效能。结果：转录组芯片筛选结果显示，CTAG1A在极早期HCC（BCLC 0期HCC）中表达显著上调（|FC| = 99.16，P < 0.000 1），临床独立样本验证显示其在各分期HCC中均呈现出高表达趋势且在早期HCC中呈现出较佳的诊断效能（BCLC 0期HCC AUC = 0.6893，敏感性 = 85.71%；BCLC A期HCC AUC = 0.8229，敏感性 = 83.33%）；进一步的分析结果显示，CTAG1A在多种肝癌细胞系中的表达显著高于相对正常肝细胞系（P < 0.001）。与甲胎蛋白（AFP）相比，CTAG1A在BCLC 0期和A期HCC中的诊断效能更优（AFP在早期HCC中ROC曲线分析无显著差异，P > 0.05）。生物信息学工具预测发现CTAG1A含8个MHC-Ⅰ型和4个MHC-Ⅱ型抗原表位。IFN-γ ELISpot实验显示，12条合成肽段能不同程度地诱导HCC患者PBMC的特异性T细胞反应。结论：CTAG1A在HCC早期即显著高表达，且具有多表位免疫原性，可能能够激活CD8⁺和CD4⁺ T细胞，提示其具有作为HCC免疫治疗靶点的潜力，可望为开发基于mRNA疫苗或过继性细胞疗法的联合免疫治疗策略提供新的方向。相较于AFP，CTAG1A在早期HCC中展现出更优的诊断效能，提示其作为HCC早期诊断标志物的可能。

[摘 要] 目的：探讨碱性亮氨酸拉链转录因子ATF样蛋白3（BATF3）在肾透明细胞癌（ccRCC）组织中的表达及其调控ccRCC细胞恶性生物学行为的分子机制。方法：收集2019年3月至2022年1月间在中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院手术切除的64例ccRCC组织和相应癌旁组织，qPCR法检测ccRCC组织、癌旁组织和肾癌ACHN、786-O细胞中BATF3 mRNA的表达，免疫组化检测ccRCC组织、癌旁组织中BATF3蛋白的表达，并分析其与临床病理特征的关系。构建BATF3敲减及过表达质粒，分别转染786-O、ACHN细胞，通过MTS法、Transwell实验检测BATF3对786-O或ACHN细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响，qPCR法检测敲减或过表达BATF3对786-O或ACHN细胞EMT相关基因表达的影响，CHIP、双荧光素酶报告基因实验检测BATF3是否与波形蛋白（VIM）启动子区结合并调控其转录，MTS法、Transwell实验检测同时过表达BATF3及敲减VIM对786-O细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结果：与癌旁组织比较，ccRCC组织中BATF3的mRNA和蛋白均呈高表达(均P<0.01)，并且BATF3 mRNA与ccRCC的分化程度和TNM分期密切关联（均P<0.01）；与正常肾上皮细胞293T相比，BATF3在ACHN及786-O细胞中均呈高表达（均P<0.01）。敲减BATF3表达均能明显抑制786-O细胞的增殖、迁移、侵袭能力(均P<0.01)，过表达BATF3则均能促进ACHN细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.01），敲减或过表达BATF3能抑制786-O细胞或促进ACHN细胞的EMT相关基因的表达（均P<0.01）。BATF3可与VIM启动子区的位点结合，直接调控VIM的转录表达。同时过表达BATF3及敲减VIM可逆转过表达BATF3对786-O细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结论：BATF3在ccRCC组织中呈高表达，并与其分化程度和TNM分期密切关联；BATF3通过调控VIM的表达影响ACHN、786-O细胞的恶性生物学行为，其可作为临床治疗ccRCC的潜在靶点。