1.Expression and functional role of COA6 in gastric cancer: regulation of malignant behaviors via the AMPK/mTOR signaling pathway
Yang Dan1 ; Xiong Xinya1,2 ; Sun Hanghang1,2 ; Han Ran3
Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2026;33(7):737-745
[摘 要] 目的:探讨细胞色素c氧化酶组装因子6(COA6)在胃癌中的表达特征、临床意义及其对胃癌细胞恶性生物学行为的调控作用与分子机制。方法:通过TIMER 2.0、人类蛋白质图谱(HPA)和UALCAN等公共数据库分析COA6在多种肿瘤组织中的mRNA表达水平及部分蛋白表达信息,并分析其与临床病理特征的关联。构建靶向COA6的敲低和过表达慢病毒载体,分别转染SGC-7901和MGC-803细胞,构建COA6稳定修饰细胞模型。敲低体系设置shCOA6‑1、shCOA6‑2、shCOA6‑3实验组及阴性对照shCOA6-NC组;过表达体系设置COA6过表达(OE)组与空载病毒(Vector)对照组,采用WB法验证各组COA6的敲低与过表达效率。随后,分别采用细胞计数实验检测细胞增殖活性,Transwell实验评价细胞侵袭能力,划痕愈合实验观测细胞迁移能力,Annexin V-FITC/PI双染色流式检测细胞凋亡水平,同时利用WB法检测AMPK/mTOR通路核心蛋白的磷酸化水平。结果:COA6在多种肿瘤中呈异常表达,且其表达水平与胃癌临床分期、病理分级、淋巴结转移及TP53突变状态有关联。功能实验表明,敲低COA6可显著抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,并促进凋亡(均P < 0.000 1);而过表达COA6则产生相反效应。机制研究发现,COA6敲低导致p-AMPK表达上调、p-mTOR表达下调,AMPK抑制剂Compound C处理可逆转COA6敲低诱导的p-AMPK升高和p-mTOR降低,提示COA6可能与AMPK活化受抑和mTOR磷酸化增强有关。结论:COA6在胃癌中高表达且与部分临床病理特征有关联,其可能通过调控AMPK/mTOR信号通路促进胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,并抑制凋亡。
2.Proteomics and molecular simulation analyses of COX17 involvement in demethylzeylasteral-mediated inhibition of proliferation and invasion of MGC-803 gastric cancer cells
Yang Dan1 ; Xiong Xinya2 ; Liao Conghui2 ; Chen Jie2 ; Sun Hanghang2 ; Han Ran3
Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2026;33(8):867-875
[摘 要] 目的:探讨细胞色素c氧化酶铜伴侣蛋白17(COX17)是否参与去甲泽拉木醛(DML)抑制胃癌细胞增殖和侵袭的作用。方法: 采用5、10和20 μmol/L DML处理MGC-803细胞,通过显微镜计数和Transwell实验评价DML对细胞增殖和侵袭的影响;采用非标记定量蛋白质组学比较DML处理组与DMSO组的蛋白表达谱,结合差异表达分析和GO功能富集筛选候选蛋白,并采用Western blotting验证DML处理后COX17蛋白表达变化。分别构建COX17敲低和过表达稳定细胞株,通过细胞计数和Transwell实验评价COX17对MGC-803细胞增殖和侵袭的影响。采用分子对接和50 ns分子动力学模拟分析DML与COX17的潜在结合模式及复合物构象稳定性;进一步通过COX17过表达回复实验评价COX17在DML抑制细胞增殖和侵袭过程中的作用。结果:DML显著抑制MGC-803细胞增殖和侵袭,且随DML浓度升高,抑制作用逐渐增强(均P < 0.000 1)。蛋白质组学共筛选出72个差异表达蛋白,其中21个上调、51个下调;结合差异表达特征、GO功能富集结果及前期研究基础,选取COX17进行后续验证。DML可显著下调MGC-803细胞中COX17蛋白表达(P < 0.000 1)。敲低COX17可抑制细胞增殖和侵袭,过表达COX17则促进上述表型。分子对接提示DML与COX17之间可能存在疏水接触、氢键和盐桥等相互作用,对接评分为−6.8 kcal/mol;分子动力学模拟显示DML-COX17复合物在50 ns模拟过程中整体趋于相对稳定。COX17过表达可部分减弱DML对MGC-803细胞增殖和侵袭的抑制作用(P < 0.01)。结论:DML可抑制MGC-803细胞增殖和侵袭并下调COX17蛋白表达,COX17可能参与DML对胃癌细胞恶性表型的调控。
3.COX17 regulates the proliferation, migration and invasion of SGC-7901 gastric cancer cells: a preliminary study
Yang Dan1 ; Xiong Xinya2 ; Liao Conghui2 ; Chen Jie2 ; Sun Hanghang2 ; Han Ran3
Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2026;33(9):951-959
[摘 要] 目的:探讨细胞色素c氧化酶铜伴侣蛋白17(COX17)在胃癌中的表达及其对胃癌细胞恶性生物学行为的调控作用。方法:运用TIMER、UALCAN、TCGA、HPA、Kaplan‑Meier Plotter数据库,分析COX17基因在泛癌、胃癌及正常胃组织中的表达差异及其与胃癌临床病理特征和预后的关系;通过STRING数据库构建COX17蛋白质相互作用网络并进行GO功能注释与KEGG通路分析;通过TIMER数据库分析COX17表达水平与免疫细胞浸润程度的相关性。采用慢病毒系统构建稳定敲低或过表达COX17的SGC-7901细胞,Western blotting法验证COX17敲低与过表达效率。通过细胞计数法检测稳转细胞模型增殖能力,Transwell细胞侵袭实验评估细胞侵袭能力;划痕愈合实验检测细胞迁移能力。结果:数据库分析显示胃癌组织及细胞中COX17 mRNA呈高表达;COX17 mRNA高表达的胃癌患者总生存期(OS)、无进展生存期(PFS)及进展后生存期(PPS)更长;COX17及其相关基因主要参与线粒体细胞色素c氧化酶、电子传递链等功能,富集于非酒精性脂肪性肝病、氧化磷酸化、产热等KEGG通路;COX17表达水平与CD4⁺ T细胞、巨噬细胞浸润呈负相关。成功构建稳定敲低或过表达COX17的胃癌细胞。功能实验表明,敲低COX17可显著抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移(均P < 0.000 1);而过表达COX17则产生相反效应(均P < 0.000 1)。结论:COX17 mRNA在胃癌组织和细胞中高表达,其高表达与胃癌患者较好的生存预后相关;但体外功能实验显示COX17可促进胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移。COX17在胃癌中的作用可能具有复杂性,其临床预后意义与体外恶性表型调控之间的差异尚需进一步研究。

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