[摘 要] 目的：探讨积雪草苷（ASI）是否通过环磷酸腺苷/蛋白激酶A/环磷酸腺苷反应成分结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)信号通路调节肝细胞癌Huh7细胞的恶性生物学行为。方法：MTT筛选合适的ASI及时间后，将Huh7细胞分为对照组、ASI低剂量组（ASI-L组，20 μmol/L ASI）、ASI中剂量组（ASI-M组，40 μmol/L ASI）、ASI高剂量组（ASI-H组，80 μmol/L ASI）及ASI-H+Forskolin组（80 μmol/L ASI+100 μmol/L cAMP激活剂-Forskolin），按照上述分组处理48 h后，MTT及细胞克隆实验检测Huh7细胞增殖；Transwell实验分析Huh7细胞迁移、侵袭变化；膜联蛋白V-FITC凋亡试剂盒检测细胞凋亡变化；ELISA实验、WB法检测Huh7细胞的cAMP分泌水平及p-PKA、p-CREB蛋白的表达水平；将Huh7细胞经皮下注射于裸鼠右腹部，建立肝癌异种移植模型，以5、15和45 mg/kg的ASI灌胃干预4周，分离肿瘤组织并称质量。结果：以接近IC50的40 μmol/L ASI处理48 h为合适的浓度和时间。ASI-L组、ASI-M组、ASI-H组Huh7细胞增殖及克隆数、迁移数、侵袭数、cAMP水平、p-PKA/PKA和p-CREB/CREB表达均显著低于对照组（均P < 0.05），而凋亡率均显著高于对照组（均P < 0.05）；ASI-H+Forskolin组Huh7细胞增殖及克隆数、迁移数、侵袭数、cAMP水平、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达均显著高于ASI-H组（均P < 0.05），而Huh7细胞凋亡率显著低于ASI-H组（P < 0.05）；在裸鼠移植瘤实验中，5、15和45 mg/kg ASI处理组的移植瘤质量均显著低于对照组（均P < 0.05）。结论：ASI可通过下调cAMP/PKA/CREB信号通路蛋白表达抑制Huh7细胞的恶性生物学行为、促进其凋亡，以及抑制裸鼠移植瘤的生长。

[摘 要] 目的：基于生物信息学方法探究几丁质酶-3样蛋白2（CHI3L2）在脑胶质瘤中的表达和生物学过程及其对患者临床预后的影响。方法：以中国脑胶质瘤基因组图谱（CGGA）为训练集（n = 325）、癌症基因组图谱（TCGA）为验证集（n = 702），对CHI3L2与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系、预后价值和生物学过程进行交叉验证分析。用Kaplan-Meier法进行生存分析，采用Cox回归模型分析CHI3L2表达及相关临床病理特征与脑胶质瘤患者预后的关系，利用受试者工作特征（ROC）曲线分析CHI3L2在脑胶质瘤诊断中的价值，用GO、KEGG及GSVA途径分析CHI3L2在脑胶质瘤中的潜在生物学过程，构建CHI3L2的列线图以校准曲线及C-Index值来评估预测的准确性。WB法和qPCR 法检测CHI3L2在正常星形胶质细胞HA1800、胶质瘤U215和U87细胞中蛋白质与mRNA水平表达的影响。选取长沙市中心医院病理科保存的7例正常脑组织、5例低级别胶质瘤（LGG, WHOⅠ~Ⅱ级）和6例胶质母细胞瘤（GBM，WHO Ⅳ级）标本进行免疫组化染色分析，验证CHI3L2在正常脑组织和不同级别脑胶质瘤组织中的表达情况。结果：CHI3L2在GBM（P < 0.000 1）、非1p/19q编码（P < 0.000 1）、IDH-野生型（P < 0.000 1）、非MGMT甲基化（P<0.01）患者中显著表达，对GBM具有一定的预测价值，并且是脑胶质瘤患者总生存期（OS）的独立预后因素（P < 0.001）。构建的列线图对脑胶质瘤患者的生存预后预测性良好。CHI3L2与LGG和GBM的免疫细胞浸润水平、肿瘤免疫微环境和免疫细胞均有显著关系。脑胶质瘤中CHI3L2蛋白（P < 0.05）和mRNA（P < 0.000 1）的表达水平与更高的恶性程度相关，免疫组化的结果进一步验证了这个发现。结论：CHI3L2的表达与脑胶质瘤的恶性程度、临床病理特征及预后关系密切，并且参与脑胶质瘤的肿瘤微环境和免疫浸润，有望成为脑胶质瘤治疗策略中的一个新靶点。