miR-124 affects malignant biological behaviours of renal cell carcinoma OS-RC-2 cells by regulating the Jagged1/Notch signaling pathway
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2022.08.005
- VernacularTitle:miR-124通过调节Jagged1/Notch信号通路影响肾细胞癌OS-RC-2细胞的恶性生物学行为
- Author:
ZHANG Wei
1
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HU Zhi
1
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FU Qiao
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SUN Wei
1
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XU Lü
1
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CHU Hao
1
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WANG Xiao
1
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ZHANG Zhichao
1
Author Information
1. Department of Urology, Wuhan Third Hospital, Wuhan 430074, Hubei, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
miR-124；Jagged1/Notch信号通路；肾细胞癌；OS-RC-2细胞；增殖；凋亡；迁移；侵袭
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2022;29(8):732-740
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探讨miR-124通过调节Jagged1（JAG1）/Notch信号通路对肾细胞癌（RCC）细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法：收集2018年6月至2021年10月在武汉市第三医院治疗的38例RCC患者的RCC组织和癌旁组织标本，并体外培养RCC细胞（Caki-2、A498、ACHN、786-O、OS-RC-2）和人正常肾细胞（293T），采用免疫组织化学法、qPCR和WB法检测miR-124和JAG1蛋白在RCC组织和细胞中的表达水平。选择miR-124表达与293T细胞差异最大的OS-RC-2细胞进行转染，按转染物不同分为Control组、NC mimic组、miR-124 mimic组、miR-124 mimic+pcDNA组和miR-124 mimic+pc-JAG1组。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-124与JAG1的关系；qPCR法检测miR-124、JAG1 mRNA表达；免疫组化法分析JAG1蛋白表达；WB法检测JAG1、凋亡相关蛋白（cleaved caspase-3、BAX和Bcl2）和Notch信号通路相关蛋白（NICD、HES1和HES5）的表达；MTT法检测OS-RC-2细胞增殖；Transwell检测OS-RC-2细胞迁移和侵袭；流式细胞术检测OS-RC-2细胞凋亡。结果：与癌旁组织比较，RCC组织中miR-124表达降低，JAG1 mRNA和蛋白表达均升高（均P<0.01）；与293T细胞比较，Caki-2、A498、ACHN、786-O、OS-RC-2细胞中miR-124水平降低，JAG1 mRNA和蛋白表达均升高（均P<0.05）；miR-124直接负调控JAG1。与Control组和NC mimic组比较，miR-124 mimic组miR-124表达水平、细胞凋亡率以及cleaved caspase-3和BAX蛋白表达均升高，JAG1 mRNA和蛋白表达均降低，细胞活力（24、48、72 h）下降，迁移、侵袭细胞数减少，Bcl2及NICD、HES1、HES5蛋白表达降低（均P<0.05）；与miR-124 mimic+pcDNA组和miR-124 mimic组相比，miR-124 mimic+pc-JAG1组miR-124表达水平、细胞凋亡率以及cleaved caspase-3和BAX蛋白表达均降低，JAG1 mRNA和蛋白表达均升高，细胞活力（24、48、72 h）增加，迁移、侵袭细胞数增多，Bcl2及NICD、HES1、HES5蛋白表达均增加（均P<0.05）。结论：miR-124通过下调JAG1抑制Notch信号通路，降低RCC OS-RC-2细胞的增殖、迁移和侵袭能力，促进细胞凋亡。
- Full text:20220805.pdf
