Effects and underlying mechanisms of HSP90β-targeting monoclonal antibody 2G1 on osteosarcoma stem-like characteristics of MG-63 sphere cells

Zhou Yanxing1; Zuo Changjun2; Zheng Rui3; Chen Lei3; Jie Yongsheng3; Shu Xiong3; Zhou Yanfang4; Zhan Yi5

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Effects and underlying mechanisms of HSP90β-targeting monoclonal antibody 2G1 on osteosarcoma stem-like characteristics of MG-63 sphere cells

VernacularTitle:靶向HSP90β的单克隆抗体2G1对MG-63球形细胞骨肉瘤干细胞样特征的影响及其机制
Author: Zhou Yanxing1 ^{1
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Author Information

1. School of Medical Technology, Guangdong Medical University, Dongguan 523808, Guangdong, China;
2. Wuhan Orthopaedic Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine & Affiliated Hospital of Wuhan Sports University, Wuhan 430079, Hubei, China;
3. Beijing Institute of Traumatic Orthopaedics, Beijing Jishuitan Hospital, Capital Medical University, Beijing 100035, China;
4. School of Basic Medicine, Guangdong Medical University, Dongguan 523808, Guangdong, China;
5. The First Affiliated Dongguan Hospital of Guangdong Medical University, Dongguan 523808, Guangdong, China
Publication Type:Journal Article
Keywords: 骨肉瘤干细胞（OSC）；HSP90β；Wnt/β-catenin信号通路；干细胞特性；功能性单抗
From: Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2026;33(8):822-829
CountryChina
Language:Chinese
Abstract: [摘要] 目的：以MG-63球形细胞作为骨肉瘤干细胞（OSC）富集模型，探讨靶向细胞膜表面HSP90β的单抗2G1对其生物学特征的影响及其与Wnt信号相关蛋白变化的关系。方法：采用无血清悬浮培养人骨肉瘤MG-63细胞获得MG-63球形细胞。通过免疫荧光共定位和免疫共沉淀实验鉴定单克隆抗体2G1识别的靶抗原；采用流式细胞术检测MG-63亲本细胞和MG-63球形细胞膜表面HSP90β的表达水平；通过甲基纤维素成球实验、Transwell迁移和侵袭实验评价单抗2G1对MG-63球形细胞成球、迁移和侵袭能力的影响；采用裸鼠皮下移植瘤模型观察单抗2G1对MG-63球形细胞体内成瘤能力的影响；进一步结合转录组测序、京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析及WB检测，分析单抗2G1处理后相关分子通路及干细胞特性、上皮-间充质转化（EMT）、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达变化。结果：免疫荧光共定位和免疫共沉淀结果显示，单抗2G1识别的靶抗原为HSP90β。流式细胞术结果显示，MG-63球形细胞膜表面HSP90β阳性表达细胞比例为（20.77 ± 1.29）%，显著高于MG-63亲本细胞的（2.87 ± 0.33）%（P < 0.001）。与对照组相比，单抗2G1处理后MG-63球形细胞成球数由82.67 ± 4.70降至42.67 ± 4.00，迁移细胞数由117.00 ± 5.57降至78.33 ± 5.03，侵袭细胞数由130.70 ± 5.03降至89.33 ± 5.03（均P < 0.001）。裸鼠移植瘤实验显示，单抗2G1组移植瘤生长受到抑制，瘤质量抑制率和瘤体积抑制率分别为（31.83 ± 16.36）%和（22.00 ± 15.48）%。转录组测序共筛选出698个差异表达基因，其中329个基因上调，369个基因下调；KEGG富集分析显示差异表达基因涉及Wnt信号通路。WB法检测结果显示，与对照组相比，单抗2G1组SOX2、OCT4、N-cadherin、p-β-catenin和c-Myc表达下调，E-cadherin表达上调（均P < 0.001）。结论：细胞膜表面HSP90β在MG-63球形细胞中高表达，靶向HSP90β的单抗2G1可抑制MG-63球形细胞的成球、迁移、侵袭及体内成瘤能力，并影响其干细胞标志物、EMT相关标志物及Wnt/β-catenin信号通路蛋白的表达水平，提示HSP90β可能参与调控MG-63球形细胞的OSC样特征，可作为骨肉瘤靶向治疗的潜在研究靶点。
Full text:2026091609264281176202608002.pdf