Enhancing anti-glioblastoma efficacy of FAP-CTLA-4 CAR-T cells combined with apatinib and the underlying mechanisms

LI Guangwen1; NIE Wenxun1△; GUO Jianhui1; LIU Mengyuan1; REN Qing1; GUO Xiwen1; CAI Shining1; HE Zhenyan2; YANG Wenli1

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Enhancing anti-glioblastoma efficacy of FAP-CTLA-4 CAR-T cells combined with apatinib and the underlying mechanisms

VernacularTitle:FAP-CTLA-4 CAR-T细胞联合阿帕替尼增强抗胶质母细胞瘤作用及机制研究
Author: LI Guangwen1 ^{1
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Author Information

1. School of Basic Medical Sciences, Zunyi Medical University, Zunyi 563006, Guizhou, China;
2. Department of Neurosurgery, The Affiliated Cancer Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450008, Henan, China
Publication Type:Journal Article
Keywords: 嵌合抗原受体T细胞；成纤维细胞活化蛋白；细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4；阿帕替尼；胶质母细胞瘤
From: Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2026;33(6):661-669
CountryChina
Language:Chinese
Abstract: [摘要] 目的：构建了一种靶向成纤维细胞活化蛋白（FAP）且能分泌CTLA-4单链抗体（scFv）的CAR-T细胞，并探讨其联合血管靶向药物阿帕替尼对胶质母细胞瘤（GBM）的抗肿瘤效果及机制。方法：构建FAP-CTLA-4 CAR过表达载体，转导至T细胞中制备FAP-CTLA-4 CAR-T细胞。流式细胞术检测FAP-CTLA-4 CAR-T细胞表面分子CD69表达，ELISPOT检测其分泌IFN-γ的能力，细胞增殖实验分析FAP-CTLA-4 CAR-T细胞的增殖情况，杀伤实验分析其联合阿帕替尼处理对人脑星形胶质母细胞瘤U-87 MG细胞治疗效果的影响。建立小鼠U-87 MG细胞异种移植瘤模型。分别用FAP-CTLA-4 CAR-T细胞单独治疗或联合阿帕替尼治疗荷瘤小鼠，命名为FAP-CTLA-4 CAR-T组、阿帕替尼组和FAP-CTLA-4 CAR-T + 阿帕替尼组，观察各组小鼠肿瘤生长情况，免疫组化、TUNEL染色与免疫荧光法检测各组肿瘤组织中Ki-67、CD31表达及细胞凋亡情况，流式细胞术分析FAP-CTLA-4 CAR-T细胞在荷瘤小鼠体内的存活状况，H-E染色和血清生化分析评估联合治疗的安全性。结果：与FAP-CTLA-4 CAR-T组、阿帕替尼组相比，FAP-CTLA-4 CAR-T + 阿帕替尼组中CAR-T细胞的活化水平显著提高，细胞增殖能力明显增强，IFN-γ分泌细胞比例及对靶细胞的杀伤效率均提高（P < 0.01或P < 0.05）。在荷瘤小鼠模型中，联合治疗显著抑制肿瘤生长并延长小鼠生存时间（P < 0.01或P < 0.05），同时抑制肿瘤细胞增殖、降低微血管密度、促进肿瘤细胞凋亡，并延长CAR-T细胞在肿瘤组织中的存活时间（P < 0.01或P < 0.05），且未对主要组织器官造成毒性损伤。结论：FAP-CTLA-4 CAR-T细胞与阿帕替尼联合应用在GBM治疗中显示出协同增效作用与良好的安全性。
Full text:2026070710574528721202606008.pdf