Wnt5a promotes vasculogenic mimicry and stemness in prostate cancer cells through miR-141-3p upregulation
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2025.10.002
- VernacularTitle:Wnt5a通过上调miR-141-3p增强前列腺癌细胞血管生成拟态与干细胞特性
- Author:
LIU Bide1,2
1
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2
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WANG Shuheng1,2
3
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JIA Hongliang1,2
1
,
2
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LI Xun1,2
1
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2
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ZHANG Xiaoan1,2
1
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2
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DONG Qiang1,2
1
,
2
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LI Jiuzhi1,2
1
,
2
Author Information
1. Department of Urology, People’s Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region, Urumqi 830001, Xinjiang, China;
2. Laboratory of Urology, People’s Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region, Urumqi 830001, Xinjiang, China
3. The Comprehensive Cancer Centre, Affiliated Drum Tower Hospital, Medical School of Nanjing University, Nanjing 210000, Jiangsu, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
前列腺癌；miR-141-3p；Wnt5a；血管生成拟态；肿瘤干细胞
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2025;32(10):1010-1018
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探究Wnt5a通过上调miR-141-3p表达对前列腺癌（PCa）细胞血管生成拟态（VM）形成及肿瘤干细胞（CSC）特性的影响。方法：选用人前列腺上皮细胞RWPE-1及PCa细胞PC-3、LNCaP和DU145，qPCR法检测细胞中miR-141-3p的表达，WB法检测细胞中Wnt5a蛋白的水平。通过质粒转染分别构建稳定敲减Wnt5a或miR-141-3p的LNCaP和DU145细胞株。采用三维培养实验检测细胞形成VM的能力，CCK-8法检测细胞增殖能力及药物敏感性，划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，qPCR和WB法检测VM相关分子及CSC标志物的表达水平，克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，流式细胞术分选并计算CD133+细胞比例，qPCR和WB法检测CD133+细胞和CD133–细胞中miR-141-3p和Wnt5a的表达水平。通过质粒转染PCa细胞构建稳定过表达Wnt5a的细胞株，qPCR法和双萤光素酶报告基因实验检测Wnt5a及不同Wnt下游信号通路抑制剂对miR-141-3p表达及启动子活性的影响；通过转染si-c-Jun敲减Wnt5a过表达细胞中c-Jun的表达，qPCR法、双萤光素酶报告基因实验及染色质免疫共沉淀实验验证c-Jun与miR-141-3p启动子的靶向结合关系。结果：miR-141-3p和Wnt5a在PCa细胞中的表达显著高于RWPE-1细胞，在DU145细胞中相对表达量最高，在LNCaP细胞中相对表达量最低（P < 0.001）。下调Wnt5a或miR-141-3p表达，均能显著抑制PCa细胞的VM形成能力及干细胞特性，显著抑制PCa细胞的增殖、迁移、侵袭能力，并能提高其对比卡鲁胺的敏感性（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001）。下调Wnt5a的表达能够显著抑制miR-141-3p的表达及启动子转录活性（P < 0.01或P < 0.05），上调Wnt5a的表达能够显著促进miR-141-3p的表达及启动子转录活性（P < 0.01或P < 0.001）；Wnt5a对miR-141-3p表达及启动子转录活性的促进作用可被JNK/c-Jun通路抑制剂所抑制（P > 0.05）。下调c-Jun的表达能够显著抑制Wnt5a对miR-141-3p表达及启动子转录活性的促进作用（P > 0.05）。c-Jun能够与miR-141-3p启动子的-348至-295序列结合，该片段缺失后，Wnt5a无法促进miR-141-3p的表达（P > 0.05）。结论：Wnt5a/JNK/c-Jun信号通路能够上调miR-141-3p的表达，从而促进PCa细胞的VM形成，其机制可能与CSC特性的激活有关。
- Full text:202511111520241038220251002.pdf
