lncRNA SOX2-OT inhibits proliferation and migration of colorectal cancer HCT-116 cells via the miR-215-5p/NOB1 axis
DOI:10.3872/j.issn.1007-385x.2025.07.008
- VernacularTitle:lncRNA SOX2-OT调控miR-215-5p/NOB1通路抑制结直肠癌HCT-116细胞增殖和迁移
- Author:
LIU Dan
1
;
CHENG Hailin
1
;
LUO Jianfeng
1
Author Information
1. Department of Infectious Diseases, Wuhan Jinyintan Hospital, Wuhan 430000, Hubei, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
lncRNA SOX2-OT;miR-215-5p/NOB1轴;结直肠癌;HCT-116细胞;增殖;迁移;侵袭
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2025;32(7):731-737
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的:探讨lncRNA SOX2-OT是否通过调控miR-215-5p/NIN1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)信号通路抑制结直肠癌(CRC)HCT-116细胞增殖和迁移。方法:收集2022年6月至2024年5月期间武汉市金银潭医院收治的29例CRC患者的癌及癌旁组织标本,以及CRC细胞SW480、HCT-116、HP116和LoVo及人结肠上皮细胞HCoEpiC。qPCR法检测CRC组织和细胞中SOX2-OT、miR-215-5p和NOB1 mRNA的表达水平。利用RNA干扰技术分别将敲低或过表达SOX2-OT质粒及阴性对照质粒转染至HCT-116细胞,实验分为对照组、si-NC组、si-SOX2-OT组、si-SOX2-OT + inhibitor(Inh)NC组、si-SOX2-OT + miR-215-5p Inh组、si-SOX2-OT + oe-NC组、si-SOX2-OT + oe-NOB1组。qPCR法检测各组细胞中SOX2-OT、miR-215-5p和NOB1 mRNA表达水平,通过MTT、划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡水平,WB法检测各组细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin、Bcl-2、BAX、PCNA、MMP-9和NOB1蛋白表达水平。通过双萤光素酶报告基因实验验证miR-215-5p与SOX2-OT和NOB1之间的靶向关系。结果:CRC组织和细胞中SOX2-OT和NOB1 mRNA均呈高表达、miR-215-5p低表达(均P < 0.05)。敲低SOX2-OT表达的HCT-116细胞中SOX2-OT和NOB1 mRNA表达水平、增殖、划痕愈合率和侵袭细胞数量,以及细胞中N-cadherin、vimentin、Bcl-2、NOB1、PCNA和MMP-9蛋白表达均显著降低(均P < 0.05),miR-215-5p、细胞凋亡率、E-cadherin和BAX蛋白表达均显著升高(均P < 0.05)。敲低miR-215-5p表达或上调NOB1表达均可减弱敲低SOX2-OT表达对细胞的抑制作用(均P < 0.05)。miR-215-5p与SOX2-OT和NOB之间存在靶向关系。结论:敲低SOX2-OT表达可促进miR-215-5p表达,抑制NOB1表达进而抑制HCT-116细胞的增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡。
- Full text:202507300937433417620250708.pdf