Screening and identification of HLA-G tumor-targeting ankyrins based on phage-display technology
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2025.07.003
- VernacularTitle:基于噬菌体展示技术筛选鉴定HLA-G肿瘤靶向锚定蛋白
- Author:
YAN Jiayao
1
;
ZHONG Liqing
1
;
LIU Baorui
1
Author Information
1. The Comprehensive Cancer Centre, Affiliated Drum Tower Hospital, Medical School of Nanjing University, Nanjing 210000, Jiangsu, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
人白细胞抗原G；噬菌体展示文库；靶向锚定蛋白；肿瘤靶向治疗
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2025;32(7):689-697
- CountryChina
- Language:Chinese
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Abstract:
[摘 要] 目的：基于噬菌体展示靶向锚定蛋白文库，以人白细胞抗原G（HLA-G）为靶点筛选锚定序列作为HLA-G结合蛋白（HGBP）并评价其功能。方法：利用TCGA、GTEx等数据库分析肿瘤组织中HLA-G表达与临床预后和免疫浸润的相关性。利用噬菌体展示靶向锚定蛋白文库对HLA-G胞外片段进行生物淘选并随机挑取单克隆进行测序。通过ELISA、免疫荧光染色鉴定优势噬菌体克隆的功能。利用原核体系生产纯化HGBP，通过ELISA、表面等离子共振（SPR）、免疫荧光染色法评价其亲和力及肿瘤特异性结合能力。结果：生物信息学分析发现，HLA-G在肿瘤组织中普遍呈高表达，其与临床总生存期、免疫细胞浸润水平具有相关性（P < 0.05）。5轮噬菌体文库筛选后获得优势克隆，ELISA及免疫荧光染色结果均显示，优势噬菌体对HLA-G阳性细胞结合显著强于阴性细胞（P < 0.05, P < 0.001）。经纯化生产的HGBP与HLA-G之间的亲和力可达17 nmol/L，ELISA结果显示，HGBP与HLA-G分子的结合显著（P < 0.05）；免疫荧光染色结果表明，HGBP能与HLA-G阳性细胞特异性结合（P < 0.01）。结论：经噬菌体展示文库筛选出的HGBP对HLA-G具有高亲和力，可特异性结合肿瘤细胞表达的HLA-G。
- Full text:202507300913076773020250703.pdf
