miR-3612 regulates the malignant biological behaviors of hepatocellular carcinoma cells via targeting SEMA4C
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2024.03.004
- VernacularTitle:miR-3612靶向SEMA4C调控肝细胞癌细胞的恶性生物学行为
- Author:
MA Siyuan1,2
1
,
2
,
3
;
ZHANG Bochao2
1
,
2
,
3
;
LI Xianrui3
1
,
2
,
3
;
CHENG Xinyue1
1
,
2
,
3
;
PU Chun1
1
,
2
,
3
Author Information
1. School of Laboratory Medicine, Wannan Medical College, Wuhu 241000, Anhui, China;
2. Department of Laboratory Medicine, the First Affiliated Hospital of Wannan Medical College, Wuhu 241001, Anhui, China;
3. School of Clinical Medicine, Wannan Medical College, Wuhu 241000, Anhui, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
肝细胞癌；Hep3B细胞；Huh7细胞；miR-3612；信号素4C；增殖；侵袭；迁移；上皮间质转化
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2024;31(3):231-239
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探讨miR-3612靶向信号素（SEMA）4C对肝细胞癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法: 收集2020年5月至2021年9月间在皖南医学院第一附属医院弋矶山医院手术切除的肝细胞肝癌的40对癌组织和相应癌旁组织，常规培养肝细胞癌Hep3B和Huh7细胞，将其分为对照组、miR-3612 mimics-NC组、miR-3612 mimics组、miR-3612 inhibitor-NC组、miR-3612 inhibitor组、si-NC组、si-SEMA4C组、mimics-NC+pcDNA-NC组、miR-3612 mimics+pcDNA-NC组和miR-3612 mimics+pcDNA-SEMA4C组，用转染试剂将相应的核酸和质粒转染各组细胞。qPCR法检测miR-3612和SEMA4C mRNA在肝细胞癌组织和Hep3B和Huh7细胞中的表达，双荧光素酶报告基因实验和免疫共沉淀（RIP）实验验证miR-3612与SEMA4C的结合及调控关系，qPCR法和WB法检测转染后各组Hep3B和Huh7细胞中miR-3612、SEMA4C mRNA和蛋白的表达，CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell小室实验分别检测各组Hep3B和Huh7细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果: miR-3612在肝细胞癌组织和Hep3B和Huh7细胞中呈低表达（P<0.001），而SEMA4C则呈高表达（P<0.001），过表达miR-3612可抑制Hep3B和Huh7细胞的增殖、迁移、侵袭和vimentin、SEMA4C蛋白的表达，促进E-cadherin蛋白的表达（P<0.05或P<0.01或P<0.001），敲低miR-3612则促进Hep3B和Huh7细胞的增殖、迁移、侵袭和SEMA4C蛋白的表达（P<0.05或P<0.01或P<0.001）。双荧光素酶报告基因实验和RIP实验证实miR-3612与SEMA4C可直接结合（P<0.001），miR-3612与SEMA4C的表达呈负相关也间接证明了这一点（P<0.001）。敲减SEMA4C能明显抑制Hep3B、Huh7细胞的增殖、侵袭和迁移能力（P<0.05或P<0.01或P<0.001），过表达SEMA4C可逆转过表达miR-3612对Hep3B和Huh7细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用（P<0.05或P<0.01或P<0.001）。结论: miR-3612通过调控SEMA4C表达影响Hep3B和Huh7细胞的恶性生物学行为，miR-3612有望成为临床肝细胞癌治疗的潜在靶点。
- Full text:20240304.pdf
