1.miR-875-5p inhibits the proliferation, migration and invasion of gastric cancer cells by targeting USF2
GAO Shenshuo1 ; ZHANG Zhikai1 ; YIN Guoqing2 ; ZHANG Hongxia1 ; WANG Xubin3 ; MA Yan1 ; LIU Hongjun1 ; LI Leping1 ; GUO Xiaobo1
Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2022;29(1):23-29
[摘 要] 目的：探讨miR-875-5p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法：采用qPCR法检测胃癌细胞BGC-823、HGC-27、MGC-803、SGC-7901、AGS、MKN-45 和胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-875-5p的表达水平。利用脂质体转染技术，分别将miR-875-5p模拟物/抑制剂（mimic/inhibitor）及其阴性对照质粒（miR-NC/Anti-miR-NC）转染至AGS细胞/MKN-45细胞，构建过表达/抑制miR-875-5p的细胞模型，空白对照组（Control组）不转染。通过CCK-8、克隆形成、Transwell等实验分别检测miR-875-5p表达变化对细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-875-5p与上游刺激因子2（USF2）的靶向关系，WB实验验证miR-875-5p对USF2的调控作用并检测USF2蛋白的表达。构建MKN-45细胞裸鼠移植瘤模型，验证miR-875-5p过表达对MKN-45细胞成瘤能力的影响。结果：miR-875-5p在6种胃癌细胞中表达水平显著低于胃黏膜上皮细胞GES-1（均P<0.01）。与Control组和miR-NC组相比，miR-875-5p mimic组AGS细胞的增殖、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数，以及USF2蛋白的表达均显著降低（P<0.05或P<0.01）；miR-875-5p inhibitor组MKN-45细胞的增殖、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数，以及USF2蛋白的表达均显著提高（P<0.05或P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证明，miR-875-5p能够直接靶向USF2基因。体内成瘤实验结果表明，过表达miR-875-5p显著抑制MKN-45细胞移植瘤的生长（均P<0.01）。结论：miR-875-5p通过靶向USF2抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。
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