1.miR-515-5p effects the carcinogenesis of esophageal cancer via targeting HDAC2 and its molecular mechanism
ZHU Yongganga,b ; SU Penga ; MENG Lingjiaob ; HUANG Chaoa ; WANG Mingboa ; SHAN Baoenb
Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2022;29(10):889-895
[摘 要] 目的:探讨miR-515-5p对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:选取2020年6月至2020年12月在河北医科大学第四医院手术切除的60例食管癌患者的癌组织标本和20例健康成人的食管上皮组织标本,以及食管癌细胞TE1、Eca109、KYSE30和KYSE170,用qPCR法检测食管癌组织和细胞中miR-515-5p的表达水平。在Eca109细胞中转染miR-515-5p模拟物以及其阴性对照物、在TE1细胞中转染miR-515-5p抑制剂以及其阴性对照物,qPCR法检测转染效率,用CCK-8法、Transwell实验分别检测转染细胞的增殖、迁移及侵袭能力。采用生物信息学方法分析预测miR-515-5p的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)为miR-515-5p的靶基因。应用GEPIA和TCGA数据集分析HDAC2在食管癌组织中的表达及其与患者临床特征的关系。结果:miR-515-5p在食管癌组织及细胞中表达降低(均P<0.01)。过表达miR-515-5p抑制食管癌Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01),而敲低miR-515-5p表达则可增强食管癌TE1细胞的增殖、侵袭和迁移能力(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因分析证明,HDAC2是miR-515-5p的靶基因。qPCR和WB实验结果显示,miR-515-5p对HDAC2 mRNA和蛋白表达具有负调控作用。挽救实验证实miR-515-5P通过靶向HDAC2抑制食管癌Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01)。结论:miR-515-5p通过靶向HDAC2影响食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
2.Expression of miR-627-3p in ESCC tissues and its effect on malignant biological behaviors of cancer cells
ZHU Yongganga,b ; TIAN Ziqianga ; ZHAO Zhenxiangc ; WANG Mingboa ; CAO Fenga ; WEN Shiwanga ; LI Zhenhuaa ; SHAN Baoenb
Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2021;28(10):978-984
[摘要] 目的:探讨miR-627-3p 在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及其对ESCC
细胞生物学行为的影响。方法:收集2015 年1 月至2015 年10 月河北医科大学第四医院胸外科手术切除的ESCC组织86 例及对
应的癌旁组织标本20 例。通过qPCR法检测miR-627-3p 在86 例ESCC组织及癌旁组织中的表达,分析其表达与ESCC患者临床
病理学指标及预后的关系;利用Kaplan-Meier Plotter 在线数据库进一步分析数据库中hsa-miR-627 的表达与ESCC患者预后的关
系;通过qPCR法检测miR-627-3p 在4 株ESCC细胞系中的表达,选取表达水平最低的食管癌细胞转染miR-627-3p mimic,选取表
达水平最高的ESCC细胞转染miR-627-3p inhibitor,采用CCK-8 法检测细胞的增殖,采用Transwell 实验检测细胞迁移和侵袭;采
用KEGG分析探讨miR-627-3p 可能介导的信号转导通路,并采用qPCR法验证miR-627-3p 对信号通路中关键基因表达的影响。
结果:miR-627-3p 在ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达,miR-627-3p 的表达与ESCC患者淋巴结转移和临床分
期相关(均P<0.05);miR-627-3p 高表达的ESCC 患者的5 年生存率明显高于miR-627-3p 低表达的食管癌患者(P<0.05)。ESCC
细胞系KYSE170 中miR-627-3p 表达最低,KYSE30 中miR-627-3p 表达最高;在KYSE170 细胞中转染miR-627-3p mimic 后,细胞
的增殖能力无明显变化(P>0.05),但细胞的迁移(P<0.05)和侵袭能力(P<0.05)显著降低;在KYSE30 细胞中转染miR-627-3p
inhibitor 后,细胞的增殖能力无明显变化(P>0.05),但细胞的迁移(P<0.05)和侵袭能力(P<0.05)显著增高。KEGG分析结果显
示,miR-627-3p 介导了多条与肿瘤相关的信号转导通路。结论:miR-627-3p 在ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表
达,其低表达与ESCC患者的不良预后相关,miR-627-3p 抑制ESCC细胞的迁移和侵袭,可能是通过干扰多条与肿瘤相关的信号
通路发挥生物学功能。