INHBA-AS1 affects ornithine metabolism and EMT process of cervical cancer HeLa cells through c-Myc/SCD pathway
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2023.06.006
- VernacularTitle:INHBA-AS1通过c-Myc/SCD通路调控宫颈癌HeLa细胞的鸟氨酸代谢和EMT进程
- Author:
HUANG Huan
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LI Chun
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SONG Yu
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XU Yuanping
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HUANG Hongli
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LU Jingquan
1
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YANG Yi
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Author Information
1. Department of Gynaecology, the Third Hospital of Wuhan, Wuhan 430074, Hubei, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
宫颈癌；HeLa细胞；抑制素β亚基A反义RNA1；硬脂酰辅酶A去饱和酶；c-Myc；上皮-间质转化；鸟氨酸代谢
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2023;30(6):497-504
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探讨抑制素β亚基A反义RNA1（INHBA-AS1）对宫颈癌HeLa细胞EMT和鸟氨酸代谢途径的影响及其机制。方法：体外常规培养HeLa细胞，实验分为10组：对照组、阴性对照（NC）组、sh-INHBA-AS1组、PluriSIn 1[硬脂酰辅酶A去饱和酶（stearyl CoA desaturase，SCD）抑制剂]组、NC+PluriSIn 1组、sh-INHBA-AS1+PluriSIn 1组、10058-F4（c-Myc抑制剂）组、NC+10058-F4组、sh-INHBA-AS1+10058-F4组、sh-INHBA-AS1+OE-c-Myc组。平板克隆实验检测各组细胞的增殖能力，FCM检测各组细胞的凋亡情况，Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭、迁移能力，qPCR法检测各组细胞中INHBA-AS1、c-Myc、SCD和EMT相关基因（N-cadherin、TGF-β、ZEB1）mRNA的表达，WB法检测各组细胞中c-Myc、SCD、EMT相关（N-cadherin、TGF-β、ZEB1）、S-腺苷-甲硫氨酸脱羧酶（SAMDC）和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶（SSAT）蛋白的表达，ELISA检测各组细胞上清液中鸟氨酸脱羧酶（ODC）的含量。结果：敲减INHBA-AS1表达使HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低（均P<0.05）而细胞凋亡率显著升高（P<0.05），qPCR、WB法检测结果显示，敲减INHBA-AS1均可显著抑制HeLa细胞中c-Myc、SCD、N-cadherin、TGF-β、ZEB1和SAMDC的表达（均P<0.05），而促进SSAT的表达（P<0.05），并降低HeLa细胞上清液中ODC的含量（P<0.05）。与c-Myc抑制剂和SCD抑制剂单独处理相比，其联合敲减INHBA-AS1后上述作用更加显著（均P<0.05）；与sh-INHBA-AS1组相比，进一步过表达c-Myc后HeLa细胞的增殖能力显著升高（P<0.05）、SCD和N-cadherin蛋白表达水平显著升高（P<0.05）、细胞上清液中ODC含量显著升高（P<0.05）。结论：INHBA-AS1可通过c-Myc调控SCD的表达，从而影响HeLa细胞鸟氨酸代谢和EMT进程，进而促进HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力。
- Full text:20230606.pdf
