Establishment and observation of a mouse model of IL-12-CAR-T cell-induced cytokine release syndrome
- VernacularTitle:IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察
- Author:
LI Chencheng1
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
LIU Xixi1
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
CHEN Biqing2a
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
TIAN Fang2a
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
ZHANG Weiguang1
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
YANG Jing1
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
REN Jiangtao3
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
XING Yun3
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
;
ZHU Xuejun1，2b
1
,
2
,
3
,
4
,
5
,
6
Author Information
- Publication Type:Journal Article
- Keywords: 嵌合抗原受体；白细胞介素-12；CAR-T细胞疗法；细胞因子释放综合征；胰腺癌细胞
- From: Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2023;30(1):28-34
- CountryChina
- Language:Chinese
- Abstract: [摘 要] 目的：通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞，探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征（CRS）模型的方法。方法：构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子，包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞。通过构建小鼠体内胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型，检测mCD19/IL-12-CAR-T细胞的抗肿瘤活性，ELISA法检测两种CAR-T细胞IL-12和IFN-γ分泌水平；经小鼠尾静脉输注mCD19/IL-12-CAR-T 细胞构建CAR-T细胞CRS小鼠模型，流式细胞术检测小鼠血清中IL-6、MCP-1、IL-1、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的含量，H-E染色法观察荷瘤小鼠肝、脾、肺和肾的病理组织学变化。结果：经过培养扩增的mCD19/IL-12-CAR-T细胞能有效分泌IL-12，CAR阳性率达（56.9±5.4）%；与非靶细胞Panc02或靶细胞Panc02-CD19共培养时，均能高分泌IFN-γ。成功构建小鼠胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型，经小鼠尾静脉注射1×106个mCD19/IL-12-CAR-T细胞能显著抑制移植瘤的生长，但未能诱发严重CRS；输注2×106个mCD19/IL-12-CAR-T细胞后，小鼠出现体质量减轻、血清炎性因子水平升高、组织损伤，最终导致死亡等一系列典型CRS表现。结论：成功构建IL-12-CAR-T细胞诱发的小鼠CRS模型，其稳定性好、重复性高，具有广泛的应用前景。
- Full text:20230104.pdf
