Cystathionine β-synthase affects the proliferation of lung adenocarcinoma A549 cells through the AKT/cyclin D1 pathway
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2022.11.014
- VernacularTitle:胱硫醚β合成酶通过AKT/cyclin D1通路影响肺腺癌A549细胞的增殖
- Author:
OUYANG Yunjie1,2
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2
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3
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CAO Peiguo1
1
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3
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ZHANG Xi1
1
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2
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3
Author Information
1. 1. Department of Oncology, the Third Hospital of Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, Hunan, China
2. 2. Department of Oncology, 921st Hospital of the People'
3. s Liberation Army Joint Logistic Support Force, Changsha 410000, Hunan, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
肺腺癌；A549细胞；胱硫醚β合成酶；AKT/cyclin D1信号通路；细胞增殖
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2022;29(11):1032-1037
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探究胱硫醚β合成酶（CBS）通过AKT/cyclin D1通路影响肺腺癌A549细胞的增殖及其分子机制。方法: 通过cBioPortal数据库分析肺腺癌组织中CBS和AKT/cyclinD1相关蛋白的表达，收集的国人肺腺癌组织通过免疫荧光法验证CBS的表达。WB法检测A549细胞及其移植瘤中半胱氨酸代谢和AKT/cyclin D1通路相关蛋白的表达。将pCW57.1-myrAKT质粒分别与RNA干扰对照质粒pGIPZ-CBS-nc-shRNA、干扰质粒pGIPZ-CBS-shNRA1和pGIPZ-CBS-shNRA2共转染A549细胞，共转染组又分多西环素（DOX）诱导组（DOX+）和不诱导组（DOX-），通过细胞集落形成实验检测转染后各组A549细胞的集落形成能力。通过CBSwt A549细胞、CBSI278TA549细胞移植瘤实验检测过表达CBS对移植瘤生长的影响，AzMC荧光染色法和免疫组织化学法分别检测移植瘤组织中H2S水平和Ki-67阳性率。结果：数据库分析和国人组织标本检测均显示，与癌旁组织比较，肺腺癌中CBS呈低表达（均P<0.01）；与SV-40细胞比较，A549、SKMES1和NCIH460细胞中CBS蛋白呈低表达（均P<0.01），而p-AKT和cyclin D1蛋白均呈高表达（均P<0.01）。A549细胞中过表达AKT显著促进细胞集落的形成（P<0.01），在此基础上敲减CBS可进一步促进细胞集落的形成(均P<0.01)。移植瘤实验显示，与DOX- CBSWT组比较，DOX+ CBSWT组中CBS、RB和P21蛋白表达升高、H2S含量增加、肿瘤体积变小、Ki-67阳性率降低（均P<0.01）；与DOX- CBS I278T组比较，DOX+ CBSI278T组中CBS表达升高（P<0.01），但H2S水平和移植瘤体积变化均不明显。结论: 肺腺癌组织和A549细胞中CBS呈低表达，而AKT/cyclin D1通路呈激活状态，过表达或敲减CBS可抑制或促进A549细胞及其移植瘤的生长，CBS和AKT/cyclin D1通路相关蛋白可能是肺腺癌的潜在靶点和标志物。
- Full text:20221114.pdf
