Hypermethylation of the transmembrane protein125 in lung adenocarcinoma mediates the activation of NF- κB signaling pathway and reduces the sensitivity to decitabine

Zheng Yamei; FU Yihui; Zhu Yike; Chen Yongxing

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Hypermethylation of the transmembrane protein125 in lung adenocarcinoma mediates the activation of NF- κB signaling pathway and reduces the sensitivity to decitabine

VernacularTitle:肺腺癌穿膜蛋白125 通过高甲基化介导NF-κB 信号通路的激活降低对地西他滨的敏感性
Author: ZHENG Yamei ¹ ; FU Yihui ¹ ; ZHU Yike ¹ ; CHEN Yongxing ¹
Author Information

1. Department of Respiratory and Critical Care Medicine, Hainan General Hospital, Haikou 570100, Hainan, China
Publication Type:Journal Article
Keywords: 穿膜蛋白；TMEM125；肺腺癌；A549 细胞；甲基化；NF-κB
From: Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2021;28(10):998-1004
CountryChina
Language:Chinese
Abstract: ［摘要］目的：探讨穿膜蛋白125（transmembrane protein125，TMEM125）在肺腺癌组织与A549 细胞中的表达，以及影响细胞的增殖和侵袭能力的分子机制。方法：从癌症基因组图谱（the cancer genome atlas，TCGA）数据库收集肺腺癌数据包，下载临床信息及基因表达谱数据。分析TMEM125 在肺腺癌组织中的表达及其与患者总生存期的相关性。构建TMEM125 过表达A549 细胞株，以CCK-8 法、细胞划痕实验检测TMEM125 过表达对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响；流式细胞术检测TMEM125 过表达对A549 细胞的细胞周期和凋亡的影响。WB检测TMEM125 过表达对下游NF-κB信号通路、凋亡蛋白的影响；免疫共沉淀法（co-immunoprecipitation，Co-IP）检测TMEM125 与NF- κB 抑制因子结合Ras 样2（NF- κB inhibitor interacting Ras-like 2， NKIRAS2）的相互作用。利用TNFα（10 ng/ml）处理TMEM125 过表达A549 细胞，CKK-8、流式细胞术及WB检测其对细胞增殖、凋亡以及NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。去甲基化试剂地西他滨处理A549 细胞，qPCR和WB检测TMEM125 基因和蛋白的表达。结果：TMEM125 mRNA在肺腺癌组织中表达水平显著低于正常组织（P<0.001），启动子甲基化水平显著高于正常组织（P<0.001），并且低、中表达患者总生存期显著低于高表达患者（P<0.001）。过表达TMEM125 抑制了A549 细胞的增殖和迁移（P<0.01），增加细胞G2/M 期，促进细胞凋亡（P<0.01）；过表达TMEM125 与NKIRAS2 相互作用，显著抑制NF- κB 的活性（P<0.01）；地西他滨处理A549 细胞可促进TMEM125 表达并且抑制细胞增殖（P<0.01）。结论：启动子高甲基化水平降低了 TMEM125 基因表达，导致其抑制NF-κB活性功能和抑制细胞增殖的作用下降，并且降低了细胞对地西他滨的敏感性。
Full text:20211007.pdf