miRNA-496 influences the malignant biological behaviors of cervical cancer HeLa cells and the growth of transplanted tumors in nude mice through mTOR
DOI:10.3872/j.issn.1007-385x.2021.11.003
- VernacularTitle:miRNA-496通过mTOR影响宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为及裸鼠移植瘤的生长
- Author:
FANG Yanhui1
1
,
2
;
MA Caijuan2
1
,
2
;
ZHANG Chunli1
1
,
2
;
ZHAI Jawei1
1
,
2
;
ZHU Qiaoying1
1
,
2
;
LIU Yin1
1
,
2
Author Information
1. 1. Department of Gynecology, the Fourth Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050011, Hebei, China
2. 2. Department of Gynecology, Jinzhou Tongji Hospital, Shijiazhuang 052260, Hebei, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
miR-496;宫颈癌;哺乳动物雷帕霉素靶蛋白;HeLa细胞;增殖;迁移;侵袭
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2021;28(11):1068-1074
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的:探讨miR-496是否通过靶向mTOR影响宫颈癌HeLa细胞的周期、增殖、迁移、侵袭以及裸鼠移植瘤的生长。方法:选取2020年12月至2021年12月期间于河北医科大学第四医院接受手术的74例宫颈癌患者的肿瘤标本和癌旁组织标本,qPCR、WB法和免疫荧光法检测宫颈癌组织中miR-496和mTOR在mRNA和蛋白水平的表达。利用TargetScan数据库预测miR-496的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。将HeLa细胞按转染物不同分为对照组、miR-496 mimic组和miR-496 mimic+pMIR-mTOR组,CCK-8法、流式细胞术和Transwell实验分别检测miR-496和mTOR对HeLa细胞增殖、周期、迁移和侵袭的影响。将对照组、miR-496 mimic组HeLa细胞接种至BALB/c裸鼠皮下构建宫颈癌裸鼠移植瘤模型,21 d后处死小鼠,剥离小鼠肿瘤组织并称取瘤质量,免疫荧光法和WB法检测miR-496过表达对移植瘤组织中mTOR和Ki67表达的影响。结果:在宫颈癌组织中,miR-496呈低表达,而mTOR mRNA和蛋白呈高表达。miR-496能够靶向结合mTOR mRNA的3’-UTR。与对照组和miR-496 mimic+pMIR-mTOR组相比,miR-496 mimic组HeLa细胞的miR-496水平和S期细胞比例均显著升高,而增殖水平、迁移和侵袭细胞数均显著降低(均P<0.01)。成功构建宫颈癌裸鼠移植瘤模型,接种21 d后,miR-496 mimic组移植瘤质量、移植瘤组织中mTOR和Ki67的表达水平均显著低于对照组(均P<0.01)。结论:miR-496在宫颈癌组织中呈低表达,miR-496过表达可通过靶向调控mTOR抑制HeLa细胞的恶性生物学行为和裸鼠移植瘤的生长。
- Full text:20211103.pdf