Effect of miRNA-490-3p regulating Smad2/TGF-β on sensitivity of colorectal cancer SW480 cells to oxaliplatin
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2021.05.010
- VernacularTitle:miRNA-490-3p调控Smad2/TGF-β影响结直肠癌SW480细胞的奥沙利铂敏感性
- Author:
LI Zhifa
1
;
WU Xiaobing
;
LUO Chaoyuan
;
CHEN Rong
Author Information
1. Department of Gastrointestinal Surgery, the Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Guangzhou 510150, Guangdong, China
- Publication Type:Journal Article
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2021;28(5):489-494
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
目的：探讨miRNA-490-3p调控Smad2/TGF-β对结直肠癌奥沙利铂化疗敏感性的影响。方法：选取100例结直肠癌（colorectal cancer，CRC）根治性手术后奥沙利铂（oxaliplatin，OXA）同种联合化疗患者作为研究对象，根据化疗情况分为耐药组（n=40）和非耐药组（n=60），用qPCR检测两组外周血miRNA-490-3p水平；选取人CRC细胞株SW480和CRC奥沙利铂（OXA）耐药型细胞株OXA-SW480进行研究，先用qPCR检测两种细胞株中miRNA-490-3p表达水平；后将miRNA-490-3p过表达载体转染OXA-SW480（过表达组），并设立空载体组（空载体转染OXA-SW480）和空白对照组（OXA-SW480未经任何处理）。用CCK-8检测各组细胞增殖能力，同时用不同浓度OXA处理各组细胞，计算其半数抑制浓度（IC50）；用Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率；用WB检测各组Smad2和TGF-β蛋白表达水平。结果：在CRC患者中，耐药组外周血miR-490-3p水平显著低于非耐药组，在CRC细胞株中，OXA-SW480耐药株细胞miR-490-3p水平显著低于正常株SW480细胞（P<0.05）。与空载体组和空白对照组相比，过表达组miR-490-3p水平显著降低（均P<0.05），增殖抑制率显著升高（均P<0.05），细胞凋亡率显著升高（均P<0.01），Smad2蛋白水平显著降低（均P<0.05），TGF-β蛋白水平显著升高（均P<0.05）。经OXA处理后，过表达组的IC50显著低于空载体组和空白对照组（均P<0.05）。经Pearson相关法分析，miR-490-3p与Smad2的表达呈负相关（r=–0.943，P<0.01），miR-490-3p与TGF-β的表达呈正相关（r=0.961，P<0.01）。结论：过表达miRNA-490-3p可增加CRC SW480细胞的OXA敏感性，此作用Smad2/TGF-β信号通路有关。
- Full text:20210510.pdf
