Fibroblast growth factor 13 regulates apoptosis of A549 cells through the ROS/ Caspase-3 pathway

Liu Tianyu; Tang Chengcheng; Feng Guang; Lei Jingjing; Sun Chenhao; Wang Ling; LU Hongzhao

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Fibroblast growth factor 13 regulates apoptosis of A549 cells through the ROS/ Caspase-3 pathway

VernacularTitle:成纤维细胞生长因子 13 通过 ROS/Caspase-3 通路调控非小细胞肺癌 A549 细胞的凋亡
Author: LIU Tianyu ¹ ; TANG Chengcheng ¹ ; FENG Guang ¹ ; LEI Jingjing ¹ ; SUN Chenhao ¹ ; WANG Ling ¹ ; LU Hongzhao ¹
Author Information

1. School of Biologic Science and Engineering, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 723001, Shaanxi, China
Publication Type:Journal Article
Keywords: 成纤维细胞生长因子 13；A549 细胞；活性氧；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶 4；Caspase-3；凋亡
From: Chinese Journal of Cancer Biotherapy 2021;28(5):451-459
CountryChina
Language:Chinese
Abstract: 目的：探讨成纤维细胞生长因子 13（fibroblast growth factor 13，FGF13）对非小细胞肺癌 A549 细胞活性氧（reactive oxygen species，ROS）的生成和凋亡的影响及其调控机制。方法：WB 法检测 FGF13 在人正常肺上皮细胞 BEAS-2B 和肺癌 A549、H460 细胞中的本底表达量。采用 FGF13 过表达载体转染 BEAS-2B 和 A549 细胞；设计两组靶向 FGF13 的 shRNA 序列，构建慢病毒干扰载体，包装病毒后侵染 A549 细胞，采用 qPCR 和 WB 法检测干扰效果，DCFH-DA 探针结合荧光酶标仪分析敲减 FGF13 对 A549 细胞内 ROS 水平的影响，MitoSOX 与 WB 法检测对线粒体 ROS 水平及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶 4（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4，NOX4）蛋白表达量的影响，Annexin V-FITC-PI 双染法检测对细胞凋亡和 Caspase-3 及 Cleaved Caspase-3 蛋白表达的影响。结果：与 BEAS-2B 细胞相比，FGF13 蛋白在两种肺癌细胞中均高表达（均 P<0.05）。成功构建 FGF13 过表达、低表达的 A549 细胞系。过表达 FGF13 后，BEAS-2B 和 A549 细胞内 ROS 水平显著降低（P<0.05）；敲减 FGF13 表达后，A549 细胞内 ROS 水平显著升高（P<0.05）；然而过表达及干扰 FGF13 对 A549 细胞内线粒体 ROS 水平无显著影响，但 NOX4 蛋白表达量显著下调（P<0.05）及显著上调（P<0.05）。FGF13 干扰后 A549 细胞凋亡率显著升高（P<0.01），Caspase-3 及 Cleaved Caspase-3 蛋白表达量显著上调（P<0.05）。结论：FGF13 可能通过 NOX 家族途径调控 ROS 的生成，并通过 ROS/Caspase-3 通路调控 A549 细胞凋亡。
Full text:20210505.pdf