Construction and functional study of CD19 CAR-T cells that secrete IL-2 locally
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2025.04.002
- VernacularTitle:局部分泌IL-2的CD19 CAR-T细胞构建与功能
- Author:
WANG Wenjuan1
1
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2
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3
;
CHEN Jing2
1
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2
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3
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HU Zhou1
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3
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LIU Xiuying1
1
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2
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3
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WANG Jianxun1, 3
1
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2
,
3
Author Information
1. 1. School of Life Sciences, Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 102400, China
2. 2. Department of Traditional Chinese Medicine, School of Health Medicine, Three Gorges University, Yichang 443002, Hubei, China
3. 3. Shenzhen Institute of Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Shenzhen 518118, Guangdong, China
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
SynNotch系统；CAR-T细胞；IL-2；CD19
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2025;32(4):356-363
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探讨基于新型单载体SynNotch系统构建的局部分泌IL-2的CAR-T细胞（Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞）对传统CD19 CAR-T细胞功能的影响。方法：基于本课题组前期构建的单载体SynNotch系统，将CD19特异性FMC63抗体与IL-2表达模块整合，通过自失活逆转录病毒载体转导T细胞制备Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞。诱导验证实验分为Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞组和未转导T细胞组，通过ELISA检测抗原刺激后IL-2分泌水平。采用CFSE染色法检测在Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞存在时，CD19 CAR-T细胞与肿瘤Raji-Luc或SW620-CD19-Luc细胞共培养时，IL-2的分泌对CD19 CAR-T细胞增殖的影响。流式细胞术检测CD69表达，观察在Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞分泌IL-2的情况下，CD19 CAR-T细胞与Raji-Luc细胞共培养时的激活情况。结果：成功构建自失活逆转录病毒载体Syn.CD19.IL-2 CAR，制备出Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞，病毒滴度 > 1×107拷贝/mL，转导效率达37.1%。抗原刺激后，SynNotch CAR-T细胞IL-2分泌量显著高于未转导T细胞（P < 0.001）。在Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞分泌IL-2时，CD19 CAR-T细胞具有更强的增殖能力和更高的活化水平（均P < 0.001）。结论：成功构建的Syn.CD19.IL-2 CAR-T细胞能显著增强CD19 CAR-T细胞的增殖和活化能力。
- Full text:202505211004426032720250402.pdf
