Role of METTL3-mediated m6A modification in regulating miR-1224-5p in the proliferation and migration of prostate cancer cells
DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2025.01.009
- VernacularTitle:METTL3介导的m6A修饰调控miR-1224-5p在前列腺癌细胞增殖和迁移中的作用
- Author:
HU Donglai1
1
,
2
;
ZHAO Ziqi1
1
,
2
;
CHU Yuankui1, 2
1
,
2
Author Information
1. (1. School of Laboratory Medicine, Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia, China
2. 2. Medical Experimental Center, General Hospital of Ningxia Medical University, Yinchuan 750003, Ningxia, China)
- Publication Type:Journal Article
- Keywords:
前列腺癌；miR-1224-5p；N6-甲基腺苷；甲基转移酶3；增殖；迁移；凋亡
- From:
Chinese Journal of Cancer Biotherapy
2025;32(1):64-72
- CountryChina
- Language:Chinese
-
Abstract:
[摘 要] 目的：探究miR-1224-5p在前列腺癌细胞增殖、迁移与凋亡中的生物学作用及其表达调控机制。方法：选用人前列腺癌细胞PC3、DU145、LNCaP、22Rv1和正常前列腺上皮细胞RWPE-1，利用qPCR法检测miR-1224-5p在前列腺癌细胞中的表达。使用脂质体转染技术分别将miR-1224-5p模拟物（mimic）、抑制剂（inhibitor）及相应的阴性对照（NC）质粒转染至PC3和DU145细胞中，qPCR法验证转染效率，采用CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验和流式细胞术分别检测转染miR-1224-5p mimic与inhibitor对细胞增殖、迁移和凋亡的影响。借助SRAMP网站预测pri-miR-1224-5p序列中潜在的N6-甲基腺苷（m6A）修饰位点，通过甲基化RNA免疫沉淀实验（MeRIP）验证预测结果，qPCR法检测m6A修饰关键调控分子甲基转移酶3（METTL3）在前列腺癌细胞中的表达，CCK-8实验和Transwell实验分别检测转染METTL3 siRNA对PC3和DU145细胞增殖和迁移的影响，qPCR法和MeRIP检测METTL3介导的m6A修饰对miR-1224-5p表达的调控作用。结果：miR-1224-5p在前列腺癌细胞中均呈高表达（均P < 0.01）。转染miR-1224-5p mimic能够促进PC3和DU145细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡（P < 0.05或P < 0.01），转染miR-1224-5p inhibitor能够抑制PC3和DU145细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡（P < 0.05或P < 0.01）。pri-miR-1224-5p具有m6A修饰位点；METTL3在前列腺癌细胞中均呈高表达（均P < 0.01），转染METTL3 siRNA能够抑制PC3和DU145细胞的增殖和迁移（均P < 0.01）；METTL3介导的m6A修饰能够调控miR-1224-5p的表达。结论：miR-1224-5p受METTL3介导的m6A修饰调控，从而在前列腺癌细胞中呈高表达，下调miR-1224-5p能够抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移并诱导细胞凋亡。
- Full text:202502281553551866020250109.pdf
